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實驗室無菌操作規(guī)章制度
隨著社會一步步向前發(fā)展,越來越多人會去使用制度,制度泛指以規(guī)則或運作模式,規(guī)范個體行動的一種社會結(jié)構(gòu)。那么擬定制度真的很難嗎?下面是小編為大家收集的實驗室無菌操作規(guī)章制度,僅供參考,大家一起來看看吧。
實驗室無菌操作規(guī)章制度1
1.目的
規(guī)范無菌操作流程,減少及避免發(fā)生染菌現(xiàn)象出現(xiàn)。
2.使用范圍
無菌室及潔凈區(qū)的操作。
3.無菌操作技術(shù)原則
3.1環(huán)境要清潔,在每次無菌操作結(jié)束后都需要對環(huán)境進行清理、清洗;且避免操作前進行清掃。
3.2做好個人衛(wèi)生,進入無菌室前需修剪指甲、洗手,穿好無菌服,帽子需遮住所有頭發(fā),口罩遮住口鼻。
3.3在無菌操作時,不可講話,打噴嚏,對懷疑染菌的無菌物品,不可使用。
4.內(nèi)容
4.1.1準備:工作人員著裝整潔,洗手、戴口罩、修剪指甲;備齊用物(如:接種針、接種環(huán)、酒精燈、斜面、平皿、搖瓶、75%酒精棉、無菌水等);核對無菌用品,接種菌種的種類、型號。
4.1.2所有實驗使用的物品都需要進行消毒、滅殺;進入潔凈區(qū)前需要經(jīng)傳遞窗進行紫外表面消毒30min以上;
4.1.3開始實驗前需要打開超凈臺的紫外燈,消毒半個小時以上;超凈臺避免放入過多的物品(一般只放入當次的實驗所有的'物品),所使用的試劑和耗材都需事先進行滅菌(滅菌日期超過4天的需重新消毒)。
4.1.4進入潔凈區(qū)前關(guān)閉紫外燈,并打開風機,等待半個小時以上,使臭氧盡量排放干凈。 4.1.5除去手腕等部位的飾品,穿好無菌服,戴好頭套、口罩,做到“三不漏”:不暴漏頭發(fā),不暴漏口鼻,不暴漏軀干皮膚和衣物。 4.1.6雙手要進行清洗、消毒。
4.1.7要經(jīng)風淋室風淋30秒后再進入潔凈室。 4.1.8在局部百級區(qū)域操作要戴一次性無菌手套。 4.1.9實驗操作過程中應(yīng)盡量減少進入潔凈區(qū)的人員(不超過4人/間)并盡量減少人員走動。 4.1.10所有要放入超凈工作臺的物品都需進過消毒液噴灑擦拭消毒。
4.1.11無菌物品若取離超凈臺則視為已污染,不得放回再用;無菌液體在取離超凈臺前必須密封其開口;密封的無菌液體容器在放入超凈臺后,對其開口前須對開口在酒精燈火焰上燒烤。
4.1.12在拆開任何一次性無菌使用耗材的包裝時都要在超凈臺內(nèi)完成,并須同時保證與細菌直接接觸的使用端/面不得與超凈臺內(nèi)的任何物品發(fā)生觸碰。 4.1.13工作臺面上的用品要放置有序、布局合理,一般說酒精燈(當工作不需要時也可不用)在中間,右手使用的物品在右側(cè),左手使用的物品在左側(cè)。工作時忌忙亂而要有序。 4.1.14開始操作前先用醫(yī)用酒精對雙手進行消毒。 4.1.15點燃潔凈工作臺內(nèi)的酒精燈,在打開/關(guān)閉試劑瓶口、試管口時應(yīng)將瓶口或者試管口過火;接種針、接種環(huán)在使用前或在與臺面發(fā)生碰觸后應(yīng)經(jīng)過火焰的灼燒;接種針/接種環(huán)過火操作方法為:使其頭部到身部反正面在火焰上各烤燎通紅;燒過的器械要冷卻后才能使用,以免對細菌造成損傷。
4.1.16操作前試管(或搖瓶)口需要在火焰上方反轉(zhuǎn)鐐銬兩周。 4.1.17操作時左手拿試管(或搖瓶),右手拇指、食指、中指操作接種針(接種環(huán)),右手小指和無名指夾住瓶塞,取下瓶塞,瓶塞再反轉(zhuǎn)鐐銬兩周后開始操作。 4.1.18在超凈臺內(nèi),盡量避免瓶口長時間敞開直立。
4.1.19蓋封瓶口時,應(yīng)將瓶口和瓶蓋內(nèi)面各自在火焰上燎烤兩周再蓋上瓶蓋。
4.1.20實驗用膠塞、橡皮乳頭等橡膠和塑料用品在過火焰時也不能時間過長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)的細胞。 4.2無菌液體標準轉(zhuǎn)移程序:
4.2.1無菌液體的轉(zhuǎn)移須在超凈臺進行,轉(zhuǎn)移過程要盡量保持密閉,必須用移液管或移液器來完成操作;
4.2.2移液管上方口應(yīng)塞入棉絮(脫脂棉),用牛皮紙包好進行消毒滅殺;
4.2.3無菌液體瓶再封口時,須將瓶口和瓶蓋分別燎烤2周后再封蓋;封蓋后須貼上相應(yīng)的標簽;
4.2.4在使用移液管轉(zhuǎn)移液體時,應(yīng)保證移液管尖端距移液器邊緣1cm以上;在使用移液管時,每次液體吸入量不應(yīng)超過移液管的警示標記,更不能觸及移液管上方的防塵棉絮;在使用移液管移出廢液時,移液管尖端應(yīng)距廢液缸5cm以上;在將細胞懸液轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中時,移液管尖端應(yīng)距培養(yǎng)瓶0.5cm以上;
4.2.5放置吸管時管口應(yīng)向下傾斜,以防液體倒流入橡皮乳頭內(nèi)而引起污染或者損壞電動移液槍;
4.2.6向離心管、細胞凍存管、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿內(nèi)添加液態(tài)物質(zhì)時,所加入的量不應(yīng)超過管上所標示的最大量;
4.2.7實驗人員在操作時,應(yīng)保證開口離心管或開口試劑的上方為不可逾越區(qū);嚴格禁止采用雙臂交叉的方式來拿取尚在開口狀態(tài)的離心管或試劑瓶;在面向操作臺工作時勿大聲講話或咳嗽,以免噴出的唾沫把細菌帶入工作臺面發(fā)生污染;
4.2.8在使用細胞刮刀時,手握部位應(yīng)盡量遠離培養(yǎng)瓶口,以防污染;
4.2.9如果在轉(zhuǎn)移任何液態(tài)物質(zhì)的過程中出現(xiàn)滴漏,則應(yīng)立即使用消毒液浸泡的棉球或紗布擦凈;
4.2.10使用完畢的實驗耗材應(yīng)在第一時間內(nèi)處理完畢,避免堆積在超凈臺內(nèi)或?qū)恿髡稚,以防污染?/p>
4.2.11當所有操作完成后,應(yīng)及時使用消毒液對臺面進行清理;擦拭完畢后再開啟紫外燈照射一個小時。
實驗室無菌操作規(guī)章制度2
1.潔凈區(qū)內(nèi)器械消毒滅菌要求
1.1無菌區(qū)外的器械清潔消毒
1)配平天平:每周至少消毒1次,表面用蘸84消毒液的無塵紙擦拭,再用75%醫(yī)用酒精擦拭。
2)臺式冷凍離心機內(nèi)腔及適配器:每日操作結(jié)束時用75%醫(yī)用酒精對離心機內(nèi)腔以及適配器內(nèi)外表面進行充分消毒,并整齊擺放于實驗臺晾干備用。
3)光學顯微鏡及倒置顯微鏡:每周對顯微鏡至少清潔消毒1次,用無塵紙擦拭顯微鏡臺面及外表面,用鏡紙蘸95%乙醇擦拭鏡頭和目鏡。
4)疫苗箱洗滌消毒:對于用過的疫苗箱應(yīng)每天用配制的84消毒液浸泡過夜,再用自來水沖洗表面,無塵紙擦拭箱內(nèi)表面。
1.2無菌操作區(qū)內(nèi)的器械清潔消毒
1)手動移液器消毒:手動移液器表面應(yīng)每周用75%醫(yī)用酒精清潔消毒,將手動移液器吸頭取下,更換過濾膜后再裝上吸頭;將手動移液器放于試驗臺充電,充電并消毒后放回無菌操作臺原位,使用前還應(yīng)開啟無菌臺內(nèi)紫外消毒30min。
2)剪刀、鑷子、止血鉗及不銹鋼器械:不銹鋼器械每處理一份標本都應(yīng)更換,使用過的器械應(yīng)用戊二醛浸泡2h,此后用自來水沖洗至少20遍,再用去離子水沖洗3遍,用紗布擦干后經(jīng)包布包裹放入干凈的消毒盒中,貼上滅菌標簽并標記日期,采用濕熱滅菌121℃/30min,滅過的器械放潔凈儲物箱備用。
3)無菌槍頭的滅菌消毒:無菌槍頭至少每周滅菌1次,戴PE手套將待滅槍頭裝入槍頭盒,蓋好后用滅菌膠帶封口并標注日期后,進行濕熱滅菌,滅菌完成后放烘箱烘干,經(jīng)傳遞窗放入潔凈區(qū)待用。
2操作過程的無菌操作要求
2.1無菌操作要求
1)無菌操作時應(yīng)穿無菌潔凈服、戴口罩、鞋套、手套,進入無菌操作區(qū)前對手套,手腕、前臂、胸部等部位的潔凈服進行75%酒精消毒;無菌操作過程中應(yīng)每隔15min對手套,手腕、前臂、胸部等部位的潔凈服進行75%酒精消毒。
2)無菌操作中應(yīng)減少進入潔凈室的人員數(shù)量;無菌操作中,操作人員應(yīng)注意力集中,不可
與其他人員交談(工作需要除外);非操作人員應(yīng)盡量遠離無菌操作區(qū)(學習、培訓除外),嚴禁在無菌操作區(qū)附近做大幅度動作,大聲講話,走來走去;打噴嚏、咳嗽應(yīng)立即前往緩沖間處理,并對潔凈服進行全面消毒,方可進入潔凈室。
3)物料、器械進入無菌操作區(qū)前應(yīng)用75%醫(yī)用酒精充分消毒,開啟紫外照射30min(嚴禁紫外照射的物料除外),方可在無菌操作區(qū)中使用。
4)無菌物品應(yīng)定期消毒并有明確的滅菌標識,保證在滅菌有效期內(nèi)使用,超有限期的物品應(yīng)重新清潔滅菌后使用。
5)無菌操作過程中,發(fā)生手套破損,應(yīng)立即更換手套,對手套進行消毒,并對可能出現(xiàn)污染的物料及器械進行更換;如發(fā)現(xiàn)無菌物料包裝出現(xiàn)破損,應(yīng)立即更換包裝完好的無菌物料,做消毒處理后使用,出現(xiàn)破損的無菌物料做廢棄處理;操作過程中,無菌器械被污染(掉落地面、接觸非無菌物品等),應(yīng)立即移出無菌操作區(qū),取備用無菌器械使用。
6)在操作CO2培養(yǎng)箱時,應(yīng)嚴格按照CO2培養(yǎng)箱使用標準操作規(guī)程操作,并用75%醫(yī)用酒精對手部、雙臂、胸部、頭部等部位進行充分消毒,然后在進行開箱操作;培養(yǎng)結(jié)束后,應(yīng)用消毒劑對CO2培養(yǎng)箱進行全面清潔消毒,并定期用紫外照射30min,以免培養(yǎng)箱染菌。
7)操作完成后,應(yīng)立即對無菌操作區(qū)進行清場,清除操作產(chǎn)生的垃圾,并對操作臺進行全面清潔消毒,并紫外照射30min;器具應(yīng)用75%醫(yī)用酒精充分清潔消毒,擺放整齊;剩余物料應(yīng)放回儲物箱,擺放整齊,蓋上儲物箱。
8)質(zhì)保員負責定期對實驗室清潔消毒效果進行取樣驗證,實驗室負責對不合格區(qū)域進行重新清潔消毒,直至檢測合格。
2.2無菌物品打開程序
1)經(jīng)過滅菌的無菌物品包括消毒盒和消毒包,應(yīng)經(jīng)無菌操作打開;開啟前應(yīng)對手套充分消毒,用75%醫(yī)用酒精噴遍每個手套及與手套接觸的潔凈服袖口。
2)消毒盒應(yīng)在無菌工作臺中心位置開啟,開啟時注意不能用手或衣袖觸碰消毒盒內(nèi)側(cè)任何部位,拿取盒內(nèi)物品時必須用消毒過的.鑷子并夾在無菌器具的手持部位,用過的器具不得再次放回無菌盒。
3)消毒包應(yīng)在潔凈區(qū)物品使用處,開啟時應(yīng)查明消毒日期,將消毒包逐層打開,注意不能用手或衣袖觸碰消毒包內(nèi)側(cè)任何部位,消毒一旦打開不應(yīng)再次包裹領(lǐng)取他用。
2.3開啟試劑瓶、裝液袋的無菌操作程序
1)試劑瓶開啟前要用75%醫(yī)用酒精充分消毒,先用酒精棉球清除表面浮塵,再用潔凈棉球從瓶蓋與瓶口接觸處開始消毒,將整個瓶蓋和瓶口下2cm都進行消毒;如有保護外蓋應(yīng)首先用剪刀或鑷子移除,然后用酒精棉球清除附著的殘留碎屑,再用酒精充分消毒;如非首次開啟使用口的試劑瓶,也應(yīng)對瓶口和瓶蓋進行酒精消毒方可打開。
2)瓶口消毒后,用無菌鑷子取下瓶蓋,并使瓶蓋內(nèi)口朝上放于無菌臺安全位置;如開啟后試劑剩余大量,需再次消毒瓶口和瓶蓋,蓋好后采用無菌封口膜密封,并標注使用日期和使用人,放4℃冰箱留下次用。
3)裝液袋(血袋或細胞輸注袋)應(yīng)直立放置在潔凈操作臺安全區(qū),盡量在密閉條件下進行液體轉(zhuǎn)移,需要打開時應(yīng)先充分消毒;對待開啟部位上下2cm處先用碘伏消毒,再用酒精消毒,最后用無菌剪刀將導管剪開或用針頭穿刺取得袋中液體。
2.4無菌液體轉(zhuǎn)移操作程序
1)無菌液體轉(zhuǎn)移應(yīng)在密閉或盡可能少的敞口開放的時間的情況下進行,轉(zhuǎn)移前應(yīng)對接口部位充分消毒,液體試劑使用后需要保存的,應(yīng)消毒后密封并標注使用日期和使用人。
2)需要開放轉(zhuǎn)移的液體,應(yīng)采用電動移液(分液)器和一次性無菌移液管操作,取下的瓶蓋應(yīng)使瓶蓋內(nèi)口朝上放在正前方的安全區(qū)域,操作中應(yīng)盡可能避免手或手臂干擾敞口容器上方氣流。
3其他說明
上述無菌操作管理要求,已在相關(guān)的設(shè)備及制備工藝操作規(guī)程中有部分體現(xiàn),應(yīng)結(jié)合實際操作執(zhí)行。
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