藥學論文的開題報告
研究意義:
1、D-半乳糖致衰老神經(jīng)細胞模型鮮見報道,明確該模型作用機制有助于利用此模型進行抗衰老藥物的篩選和機理研究。
2、梓醇在衰老動物模型上的效果明顯,利用細胞模型的研究有助于闡明梓醇抗衰老作用的`分子作用機制。
研究內(nèi)容:
采用小鼠腦神經(jīng)元細胞原代培養(yǎng),以D-半乳糖誘導體外神經(jīng)元細胞衰老,并通過研究藥物梓醇的加入對神經(jīng)元細胞的作用,進行細胞形態(tài)學觀察、細胞活力、細胞凋亡等綜合指標的測定。
實驗過程中應(yīng)用細胞免疫組化染色和熒光染色技術(shù)、流式細胞儀、熒光顯微鏡、紫外分光光度計、熒光酶標儀等方法手段,研究梓醇在體外的神經(jīng)保護作用機制。
預期達到的成果和水平:梓醇對D-半乳糖引起的小鼠腦神經(jīng)元細胞衰老有保護作用.
因此本課題擬利用原代培養(yǎng)SD大鼠乳鼠腦皮層神經(jīng)細胞,從超微結(jié)構(gòu)、細胞周期分析及SA-β-半乳糖苷酶(Senescence associated β-galactosidase)化學染色等指標觀察D-半乳糖培養(yǎng)對神經(jīng)元擬老化反應(yīng)并從生化方面研究梓醇的抗老化作用。
研究重點難點:
1、掌握原代神經(jīng)元細胞的培養(yǎng)、免疫組織化學等實驗技術(shù)。
2、明確D-半乳糖致神經(jīng)元衰老的作用濃度和作用時間范圍。
3、初步研究D-半乳糖致神經(jīng)元衰老的作用機理。
4、明確梓醇對D-半乳糖致衰老神經(jīng)元的作用效果。
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