課程名稱：儀器分析

　　指導(dǎo)教師：xxxx

　　實(shí)驗(yàn)員：xxxxx

　　時(shí)間：20xx年x月xx日

　　一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>

　　（1）掌握研究顯色反應(yīng)的一般方法。

　�。�2）掌握鄰二氮菲分光光度法測(cè)定鐵的原理和方法。

　�。�3）熟悉繪制吸收曲線的方法，正確選擇測(cè)定波長(zhǎng)。

　�。�4）學(xué)會(huì)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法。

　�。�5）通過鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵在未知式樣中的含量，掌握721型，723型分光光度計(jì)的正確使用方法，并了解此儀器的主要構(gòu)造。

　　二、原理：

　　可見分光光度法測(cè)定無機(jī)離子，通常要經(jīng)過兩個(gè)過程，一是顯色過程，二是測(cè)量過程。為了使測(cè)定結(jié)果有較高靈敏度和準(zhǔn)確度，必須選擇合適的顯色條件和測(cè)量條件，這些條件主要包括入射波長(zhǎng)，顯色劑用量，有色溶液穩(wěn)定性，溶液酸度干擾的排除。

　　1、入射光波長(zhǎng)：一般情況下，應(yīng)選擇被測(cè)物質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)的光為入射光。

　　2、顯色劑用量：顯色劑的合適用量可通過實(shí)驗(yàn)確定。

　　3、溶液酸度：選擇適合的酸度，可以在不同PH緩沖溶液中加入等量的被測(cè)離子和顯色劑，測(cè)其吸光度，作DA—PH曲線，由曲線上選擇合適的PH范圍。

　　4、有色配合物的穩(wěn)定性：有色配合物的顏色應(yīng)當(dāng)穩(wěn)定足夠的時(shí)間。

　　5、干擾的排除：當(dāng)被測(cè)試液中有其他干擾組分共存時(shí)，必須爭(zhēng)取一定的措施排除2+4鄰二氮菲與Fe在溶液中形成穩(wěn)定橙紅色配合物。配合無的ε = ×10L· mol ·cm—1 。

　　配合物配合比為3：1，PH在2—9（一般維持在PH5—6）之間。在還原劑存在下，顏色可保持幾個(gè)月不變。Fe3+與鄰二氮菲作用形成淡藍(lán)色配合物穩(wěn)定性教差，因此在實(shí)際應(yīng)用中加入還原劑使Fe 3+還原為Fe2+與顯色劑鄰二菲作用，在加入顯色劑之前，用的還原劑是鹽酸羥胺。

　　此方法選擇性高Br3+ 、Ca2+ 、Hg 2+、Zn2+及Ag+等離子與鄰二氮菲作用生成沉淀，干擾測(cè)定，相當(dāng)于鐵量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+ 、Zn2+ 、Sio32—，20倍的Cr3+、Mn2+、VPO3—45倍的Co2+、Ni2+、Cu2+等離子不干擾測(cè)定。

　　三、儀器與試劑：

　　1、儀器：721型723型分光光度計(jì)，500ml容量瓶1個(gè)，50 ml容量瓶7個(gè)，10 ml移液管1支，5ml移液管支，1 ml移液管1支，滴定管1支，玻璃棒1支，燒杯2個(gè)，吸爾球1個(gè)，天平一臺(tái)。

　　2、試劑：（1）鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液100ug·ml—1，準(zhǔn)確稱取鐵鹽NH4Fe（SO4）2·12H2O置于燒杯中，加入鹽酸羥胺溶液，定量轉(zhuǎn)依入500ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度充分搖勻。

　　（2）鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液10ug·ml—1。用移液管移取上述鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液10ml，置于100ml容量瓶中，并用蒸餾水稀釋至刻度，充分搖勻。

　　（3）鹽酸羥胺溶液100g·L（用時(shí)配制）。

　　（4）鄰二氮菲溶液·L—1先用少量乙醇溶液，再加蒸餾水稀釋至所需濃度。

　　（5）醋酸鈉溶液·L—1μ—1。

　　四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與操作步驟：

　　1、準(zhǔn)備工作

　�。�1）清洗容量瓶，移液官及需用的玻璃器皿。

　　（2）配制鐵標(biāo)溶液和其他輔助試劑。

　　（3）開機(jī)并試至工作狀態(tài)，操作步驟見附錄。

　�。�4）檢查儀器波長(zhǎng)的正確性和吸收他的配套性。

　　2、鐵標(biāo)溶液的配制準(zhǔn)確稱取鐵鹽NH4Fe（SO4）·12H2O置于燒杯中，加入10mlHCL加少量水。溶解入500ml容量瓶中加水稀釋到容量瓶刻度。

　　3 、繪制吸收曲線選擇測(cè)量波長(zhǎng)

　　取兩支50ml干凈容量瓶，移取100μ g m l—1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液容量瓶中，然后在兩個(gè)容量瓶中各加入鹽酸羥胺溶液，搖勻，放置2min后各加入鄰二氮菲溶液，醋酸鈉溶液，用蒸餾水稀釋至刻度線搖勻，用2cm吸收池，試劑空白為參比，在440—540nm間，每隔10nm測(cè)量一次吸光度，以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，確定最大吸收波長(zhǎng)

　　4、工作曲線的繪制

　　取50ml的容量瓶7個(gè)，各加入μɡ ml—1鐵標(biāo)準(zhǔn)，然后分別加入鄰二氮菲溶液，醋酸鈉溶液，用蒸餾水稀釋至刻度線搖勻，用2cm吸收池，以試劑空白為參比溶液，在選定波長(zhǎng)下測(cè)定并記錄各溶液光度，記當(dāng)格式參考下表：

　　5、鐵含量的測(cè)定

　　取1支潔凈的50ml容量瓶，加人含鐵未知試液，按步驟（6）顯色，測(cè)量吸光度并記錄。

　　K= B= — R*R= CONC。 =K *ABS+B C = ml—1

　　6、結(jié)束工作

　　測(cè)量完畢，關(guān)閉電源插頭，取出吸收池，清洗晾干后人盆保存。清理工作臺(tái)，罩上一儀器防塵罩，填寫儀器使用記錄。清洗容量瓶和其他所用的玻璃儀器并放回原處。

　　五、討論：

　�。�1）在選擇波長(zhǎng)時(shí)，在440nm——450nm間每隔10nm測(cè)量一次吸光度，最后得出的λmix=510nm，可能出在試劑未搖勻，提供的λmix=508nm，如果再縮減一點(diǎn)進(jìn)程，試齊充分搖勻，靜置時(shí)間充分，結(jié)果會(huì)更理想一些。

　�。�2）在測(cè)定溶液吸光度時(shí)，測(cè)出了兩個(gè)9，實(shí)驗(yàn)結(jié)果不太理想，可能是在配制溶液過程中的原因：a、配制好的溶液靜置的未達(dá)到15min；b、藥劑方面的問題是否在期限內(nèi)使用（未知）因從溶液顯色的效果看，顏色有點(diǎn)淡，要求在試劑的使用期限內(nèi)使用；c、移取試劑時(shí)操作的標(biāo)準(zhǔn)度是否符合要求，要求一個(gè)人移取試劑。

　　在配制試樣時(shí)不是一雙手自始至終，因而所觀察到的結(jié)果因人而異，導(dǎo)致最終結(jié)果偏差較大，另外還有實(shí)驗(yàn)時(shí)的溫度，也是造成結(jié)果偏差的原因。

　　本次實(shí)驗(yàn)階段由于多人操作，因而致使最終結(jié)果不精確。

　　（1）在操作中，我覺得應(yīng)該一人操作這樣才能減少誤差。

　�。�2）在使用分光計(jì)時(shí)，使用同一標(biāo)樣，測(cè)同一溶液但就會(huì)得出不同的值。這可能有幾個(gè)原因：a、溫度，b、長(zhǎng)時(shí)間使用機(jī)器，使得性能降低，所以商量得不同值。（李國(guó)躍）在實(shí)驗(yàn)的`進(jìn)行當(dāng)中，因?yàn)榧釉嚇拥牧慷加芯�確的規(guī)定，但是在操作中由于是手動(dòng)操作所以會(huì)有微小的誤碼率差量，但綜合了所有誤差量將成為一個(gè)大的誤差，這將導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果會(huì)產(chǎn)生較大的誤碼率差。

　　在配制溶液時(shí)，加入拭目以待試劑順序不能顛倒，特別加顯色劑時(shí)，以防產(chǎn)生反應(yīng)后影響操作結(jié)果。

　　六、結(jié)論：

　�。�1）溶液顯色，是由于溶液對(duì)不同波長(zhǎng)的光的選擇的結(jié)果，為了使測(cè)定的結(jié)果有較好的靈敏度和準(zhǔn)確度，必須選擇合適的測(cè)量條件，如：入射波長(zhǎng)，溶液酸度，度劑使用期限。

　�。�2）吸收波長(zhǎng)與溶液濃度無關(guān)，不同濃度的溶液吸收都很強(qiáng)烈，吸收程度隨濃度的增加而增加，成正比關(guān)系，從而可以根據(jù)該部分波長(zhǎng)的光的吸收的程度來測(cè)定溶液的濃度。

　�。�3）此次試驗(yàn)結(jié)果雖不太理想，但讓我深有感觸，從中找到自己的不足，并且懂得不少試驗(yàn)操作方面的知識(shí)。從無知到有知，從不熟練到熟練使用使自己得到了很大的提高。

　　附錄：

　　723型操作步驟

　　1、插上插座，按后面開關(guān)開機(jī)

　　2、機(jī)器自檢吸光度和波長(zhǎng)，至顯示500。

　　3、按OTO鍵，輸入測(cè)定波長(zhǎng)數(shù)值按回車鍵。

　　4、將考比溶液（空白溶液）比色皿置于R位以消除儀器配對(duì)誤碼率差，拉動(dòng)試樣架拉桿，按ABS01鍵從R、S1、S2、S3，逐一消除然后再檢查1~~2次看是否顯示0.000否則重新開始。

　　5、按RAN按3鍵，回車，再按1鍵，回車。

　　6、逐一輸入標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度值，每輸一個(gè)按回車，全部輸完，再按回車。

　　7、固定考比溶液比色皿（第一格為參比溶液）其余三格放標(biāo)準(zhǔn)試樣溶液，每測(cè)一值，拉桿拉一格，按START/STOP全打印完，按回車

　　8、機(jī)器會(huì)自動(dòng)打印出標(biāo)準(zhǔn)曲線K、B值以及相關(guān)系R。

　　9、固定參比溶液比色皿，其余三格放入待測(cè)水樣，逐一測(cè)定。

　　10、完畢后，取出比色皿，從打印機(jī)上撕下數(shù)據(jù)，清掃儀器及臺(tái)面關(guān)機(jī)。

　　AλC

　　T/A

　　721型分光度計(jì)操作步驟

　　1、開機(jī)。

　　2、定波長(zhǎng)入=700。打開蓋子調(diào)零。

　　3、關(guān)上蓋子，調(diào)滿刻度至100。

　　4、參比溶液比色皿放入其中，均合100調(diào)滿。

　　5、第一格不動(dòng)，二，三，四格換上標(biāo)液（共計(jì)七個(gè)點(diǎn)）調(diào)換標(biāo)液時(shí)先用蒸餾水清洗后，再用待測(cè)液（標(biāo)液）清洗，再測(cè)其分光度（濃度）

有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告6